Vitellogenin plasma levels in two cultured African catfish species, Chrysichthys nigrodigitatus (Claroteidae) and Heterobranchus longifilis (Clariidae)

Niveaux de la vitellogénine du plasma chez deux poissons-chats africains élevés en aquaculture, Chrysichthys nigrodigitatus (Claroteidae) et Heterobranchus longifilis (Clariidae)

¹ ORSTOM-CRO, Institut français de recherche scientifique pour le développement en coopération, Centre de Recherches Océanologiques, BP Vl8 Abidjan, Côte d'Ivoire
² CRO, Centre de Recherches Océanologiques, BP Vl8 Abidjan, Côte d'Ivoire
³ UA INRA de Biologie de la Reproduction des Poissons, Université de Bordeaux I, avenue des Facultés, 33405 Talence cedex, France

Received: 22 July 1996
Accepted: 23 April 1997

Abstract

Two specific Enzyme Linked lmmunosorbent Assays (ELISA) for vitellogenin were developed using two different antisera anti-plasma vitellogenin purified by SDS polyacrilamide gel electrophoresis and electroelution. Purified vitellogenins migrated as single bands under SDS conditions with an apparent molecular mass of 154 and 152 kDa for Chrysichthys nigrodigitatus and Heterobranchus longifilis respectively. The ELISA was performed on 96 well microtiter plates using specific antibodies raised on rabbits and a second antibody (Goat anti-rabbit) labeled with peroxidase. Parallel displacement curves were obtained between purified vitellogenin and female plasma as well as plasma from estradiol treated fish. Both antibodies cross-reacted with the heterologous vitellogenin but the curves were not parallel, indicating different antigenic structures of the two vitellogenin molecules from the two catfish species. The reliability and the specificity of these assays allowed us to quantify vitellogenin in plasma samples during vitellogenesis of the two species. The annual vitellogenin plasma levels presented a good correlation with mean oocyte diameter and reproduction period in Chrysichthys nigrodigitatus. In Heterobranchus longifilis the mean oocyte diameter is almost constant all year round, but vitellogenin levels presented significant variations with higher levels corresponding mainly to the low gonado-somatic index values observed during the dry seasons.

Résumé

Deux dosages ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) spécifiques de la vitellogénine ont été développés en utilisant deux anticorps anti-vitellogénine plasmatique purifiée par électrophorèse sur gel polyacrilamide en SDS (dodécyl-sulfate de sodium) et électro-élution. Les vitellogénines purifiées présentent une masse moléculaire en conditions SDS de 154 et 152 kDa pour Chrysichthys nigrodigitatus et Heterobranchus longifilis respectivement. Le dosage ELISA a été réalisé sur des plaques de 96 puits en utilisant les anticorps anti-vitellogénine obtenus sur lapin et un deuxième anticorps marqué à la peroxydase. Les courbes de déplacement sont parallèles entre les plasmas de femelles ainsi que des plasmas de poissons traités à l'estradiol. Les deux anticorps présentent une réaction croisée avec la vitellogénine hétérologue, mais les courbes de déplacement ne sont pas parfaitement parallèles, ce qui indique une différence de structure antigénique pour les deux molécules de vitellogénine des deux espèces de poissons-chats. La bonne reproductibilité et la spécificité de ces deux dosages nous ont permis de quantifier la vitellogénine dans le plasma pendant la vitellogenèse de ces deux espèces. Les variations annuelles de vitellogénine présentent une bonne corrélation avec le diamètre ovocytaire moyen chez Chrysichtys nigrodigitatus. Chez Heterobranchus longifilis le diamètre ovocytaire moyen est pratiquement constant tout au long de l'année, mais les niveaux de vitellogénine présentent des variations significatives dont les valeurs les plus élevées correspondent principalement aux faibles valeurs du rapport gonado-somatique (RGS) que nous observons au cours des deux saisons sèches.