Survival of ovulated oocytes of the European catfish (Silurus glanis) after in vivo and in vitro storage or exposure to saline solutions and urine

Survie d'ovules chez le poisson-chat européen Silurus glanis conservés in vivo et in vitro ou dilués dans différentes solutions salines et dans de l'urine

¹ Address for correspondence: Reseach Institute of Fish Culture and Hydrobiology, Dept. of Fish Genetics and Breeding, 38925 Vodnany, Czech Republic
² Laboratory of Ichthyology, National Museum of Natural History, 43, rue Cuvier, 75231 Paris, France

Accepted: 14 March 1995

Abstract

Survival of Silurus glanis ovulated oocytes (ova) measured by the capacity of normal development i.e. percentage of normal and abnormal hatched larvae after in vivo and in vitro storage and exposure to sperm activating or immobilizing solutions and urine was studied. In the case of ovulated oocytes left in the ovaries, total hatching and abnormal hatched larvae (in % of hatching) were respectively 74 and 8.2% immediately after ovulation, 77 and 8.6% after 2 h, 54 and 18% after 4 h, and 38 and 50% after 6 h of storage. Four and 6 h stay of ovulated oocytes in ovaries resulted in a significant increase of abnormal hatched larvae (p < 0.01). For the ova stored in vitro, the capacity to undertake a full embryonic development after fertilization was not significantly changed either after 8.5 h at 19 °C or 3.5 h at 25 °C; there was no ova survival at all after 3.5 h storage at 8 °C, 12 h at 19 °C and 8.5 h at 25 °C. There was a significant increase of abnormal larvae after 3.5 h at 25 °C (74%, p < 0.001) and after 8.5 h at 19 °C (37%, p < 0.05). Exposure of non inseminated ova to water buffered to pH 7.0 (5 mM Tris-HCl) to sperm activating solution (17 or 41 mM NaCl, 5 mM Tris-HCl, pH 8.0) or to immobilizing solution (200 mM NaCl, 30 mM Tris-HCl, pH 7.0) resulted in a regular and rapid decrease of their capacity of development; this was 10% of normal hatched larvae within 4 min in water, and within 6-8 min in the NaCl solutions. A similar situation was observed after exposure to urine with a loss of embryonic development of 30% within 3 min. These results indicate that all steps of the whole procedure of gamete collection and artificial insemination should be carried out rapidly as soon as possible after ovulation.

Résumé

La survie des ovules de Silurus glanis conservés in vivo (dans l'ovaire), in vitro ou dilués dans des solutions d'immobilisation ou d'activation du sperme et dans l'urine est évaluée par le pourcentage d'éclosion de larves normales et anormales. Dans le cas d'ovules laissés dans les ovaires, les pourcentages totaux d'éclosion et ceux de larves anormales sont respectivement de 74 et 8,2 % immédiatement après l'ovulation, 77 et 8,6 % après 2 h de séjour, 54 et 18 % après 4 h et 38 et 50 % après 6 h. Après 4 et 6 h de séjour des ovules le pourcentage total d'éclosion diminue de façon significative et celui de larves anormales augmente. Dans le cas d'ovules conservés in vitro et non dilués, la fertilité initiale n'est pas modifiée après 8.5 h à 19 °C ou 3,5 h à 25 °C mais aucune survie n'est observée après 3,5 h à 8 °C, 12 h à 19 °C et 8,5 h à 25 °C. Des ovules non fécondés, placés dans les solutions d'activation (17 ou 41 mM NaCl, 5 mM Tris-HCl, pH 8,0) ou d'immobilisation (200 mM NaCl, 30 mM Tris-HCl, pH 7,0) du sperme subissent une rapide diminution de leur capacité à donner lieu à un développement embryonnaire. Le taux d'éclosion est de 10 % de larves normales, après 4 min dans de l'eau douce tamponnée (5 mM Tris-HCl, pH 7,0), après 6-8 min dans les solutions de NaCl. Le pourcentage d'éclosion est réduit de 30 % lorsque les ovules sont placés dans l'urine pendant 3 min. Les étapes de l'ensemble de la procédure de récolte des gamètes et d'insémination artificielle doivent être effectuées le plus rapidement possible après l'ovulation.