Qualité de la membrane des spermatozoïdes de truite arc-en-ciel (Oncorhynchus mykiss) ; relation avec l'aptitude du sperme à la congélation

Membrane properties of spermatozoa from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) and their relationship to the freezing ability of sperm

INRA, Laboratoire de Physiologie des Poissons, Campus de Beaulieu, 35012 Rennes Cedex, France

Reçu : 13 Juillet 1989
Accepté : 28 Septembre 1989

Résumé

Les spermes de deux lots de 20 mâles d'une souche de truite arc-en-ciel (Oncorhynchus mykiss) à reproduction printanière, ont été collectés individuellement une fois par semaine pendant 10 semaines. Seuls les spermes d'un volume supérieur à 5 cm³ ont été utilisés pour cette étude. Pour chacun, la concentration en spermatozoïdes, l'osmolarité et les concentrations enzymatiques en glutamique oxaloacétique transaminase (GOT) et stéroïdienne en 17 α, 20 β-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17 α, 20 β-OH-P) du plasma séminal ont été mesurées. Des échantillons de spermatozoïdes ont été incubés pendant 1 et 24 heures dans des solutions hypotoniques (60 et 20 mOsm) et leurs réactions (gonflement, éclatement, colorabilité ou non par l'iodure de propidium) ont été analysées. Un échantillon de chaque sperme a été congelé en boulettes à partir desquelles la GOT libérée par les spermatozoïdes après décongélation a été dosée. Des fécondations ont été réalisées avec du sperme frais et du sperme congelé-décongelé.

L'analyse factorielle des correspondances (AFC) entre la fécondante du sperme après congélation d'une part et la fécondante à l'état frais, les caractéristiques physico-chimiques et les résultats des différents tests de qualité membranaire d'autre part, a montré que l'aptitude à la cryoconservation peut être estimée a priori à partir de la mesure de la pression osmotique séminale et de tests reflétant l'intégrité fonctionnelle de la membrane. Ce résultat confirme le rôle déterminant de la membrane lors de la congélation.

Abstract

Milt was collected from two groups of 20 males each, once a Week for 10 weeks from springspawning rainbow trout strain (Oncorhynchus mykiss). Only semen with a volume greater than 5 cm³ were studied. Physico-chemicals characteristics of different milts were measured (spermatozoa concentration, osmolality, glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) and 17 α, 20 β-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17 α, 20 β-OH-P) levels in the séminal fluid). Spermatozoa samples were submitted te swelling tests in hypotonie solutions (60 and 20 mOsm) over 1 and 24 hours and their response monitored (swelling, bursting and stainability with propidium iodide). A sample of each milt was frozen into pellets and the quantity of GOT released by the spermatozoa was measured after thawing. Fertilization tests were done with both fresh and cryopreserved sperm.

Factorial analysis of correspondances was performed between fresh and frozen milt fertility versus Physico-chemical characteristics and membrane quality. Fitness for cryopreservation tan be established a priori by measuring seminal osmolality and performing tests which indicate the membrane's functional integrity. These results confirm the membrane determininge role during freezing.